Holthuizen (Nedersaksisch: Holthuuzn) is een buurtschap in de Twentse gemeente Haaksbergen in de Nederlandse provincie Overijssel. Het ligt ten westen van Haaksbergen, ten zuiden van St. Isidorushoeve en ten noordoosten van Brammelo.
Geschiedenis Holthuizen werd in de middeleeuwen reeds vermeld als Holthusen (vóór 1497).Historisch Centrum Overijssel - Repertorium op de Overstichtse en Overijsselse leenprotocollen 1379-1805 - Richterambt Haaksbergen, buurschap Holthuizen
In het verleden vormde Holthuizen samen met de buurschappen Stepelo en Eppenzolder een marke.Overzicht van de verzamelde archiefbescheiden en verzamelingen in het Historisch Centrum Haaksbergen Mogelijk vormde het eerst een zelfstandige marke en werd het pas in de 17e eeuw bij Stepelo en Eppenzolder gevoegd.
Categorie:Haaksbergen Categorie:Buurtschap in Overijssel