Das HA-Tag ist ein Protein-Tag, der bei der Erzeugung und Charakterisierung von rekombinanten Proteinen verwendet wird.
Eigenschaften Das HA-Tag basiert auf einem Teil des Hämagglutinins (Position 98–106) und besitzt die Aminosäuresequenz YPYDVPDYA.J. Field, J. Nikawa, D. Broek, B. MacDonald, L. Rodgers, I. A. Wilson, R. A. Lerner, M. Wigler: Purification of a RAS-responsive adenylyl cyclase complex from Saccharomyces cerevisiae by use of an epitope addition method. In: Molecular and cellular biology. Band 8, Nummer 5, Mai 1988, S. 2159–2165, PMID 2455217, . Es wurde 1988 von J. Field und Kollegen veröffentlicht und ist eines der älteren Protein-Tags. Die monoklonalen Antikörper 12CA5 (Mausursprung) und 3F10 (Rattenursprung) binden an das HA-Tag.Viki Allan: Protein Localization by Fluorescence Microscopy. OUP Oxford, 1999, ISBN 978-0-191-56591-5, S. 187. Es kann am N- oder C-Terminus des Proteins angehängt werden.Michael Wink: An Introduction to Molecular Biotechnology. John Wiley & Sons, 2006, ISBN 978-3-527-31412-6, S. 217. Zur Erhöhung der Antikörperbindung kann es bis zu dreimal in Serie verwendet werden. Das HA-Tag eignet sich nicht zur Reinigung von Proteinen aus apoptotischen Zellen, da es durch die Caspase-3 und Caspase-7 nach der Sequenz DVPD abgespalten wird.L. Schembri, R. Dalibart, F. Tomasello, P. Legembre, F. Ichas, F. De Giorgi: The HA tag is cleaved and loses immunoreactivity during apoptosis. In: Nature methods. Band 4, Nummer 2, Februar 2007, S. 107–108, , PMID 17264856.
Einzelnachweise
Kategorie:Protein-Methode Kategorie:Biochemisches Nachweisverfahren Kategorie:Biochemisches Trennverfahren