mini|GFP aus Aequorea victoria, Wildtyp-Form. rxYFP (Abkürzung für Redox-sensitive YFP) ist eine veränderte Variante des grün fluoreszierenden Proteins, bei der sich die Fluoreszenz redox-abhängig ändert.H. Østergaard, C. Tachibana, J. R. Winther: Monitoring disulfide bond formation in the eukaryotic cytosol. In: The Journal of Cell Biology. Band 166, Nummer 3, August 2004, S. 337–345, . . PMID 15277542. .K. A. Lukyanov, V. V. Belousov: Genetically encoded fluorescent redox sensors. In: Biochimica et Biophysica Acta. Band 1840, Nummer 2, Februar 2014, S. 745–756, . (freier Volltext). PMID 23726987.
Eigenschaften rxYFP besitzt im Vergleich zur Wildtyp-Form des GFP zwei oxidierbare Cysteine. Durch Oxidation der Thiolgruppen der Cysteine wird Cystin gebildet, was sich in einer Minderung der Fluoreszenz des rxYFP auswirkt.
Anwendungen Das rxYFP wird unter anderem als redox-abhängiger Biosensor und als Reporterprotein verwendet. Mit rxYFP kann das Redox-Potential und die Menge an Glutathion im Zytosol oder im Zellkern in vivo bestimmt werden.M. Dardalhon, C. Kumar, I. Iraqui, L. Vernis, G. Kienda, A. Banach-Latapy, T. He, R. Chanet, G. Faye, C. E. Outten, M. E. Huang: Redox-sensitive YFP sensors monitor dynamic nuclear and cytosolic glutathione redox changes. In: Free radical biology & medicine. Band 52, Nummer 11–12, 2012 Jun 1-15, S. 2254–2265, . . PMID 22561702. .A. Banach-Latapy, T. He, M. Dardalhon, L. Vernis, R. Chanet, M. E. Huang: Redox-sensitive YFP sensors for monitoring dynamic compartment-specific glutathione redox state. In: Free Radical Biology and Medicine. Band 65, Dezember 2013, S. 436–445, . . PMID 23891676.
Alternative optische Nachweisverfahren verwenden z. B. Resazurin (synonym AlamarBlue), Dichlorofluorescein (DCF) oder die Proteine HyPer oder roGFP.S. Pouvreau: Genetically encoded reactive oxygen species (ROS) and redox indicators. In: Biotechnology journal. Band 9, Nummer 2, Februar 2014, S. 282–293, . . PMID 24497389.
Einzelnachweise
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