mini|GFP aus Aequorea victoria, Wildtyp-Form.
HyPer ist eine veränderte Variante des grün fluoreszierenden Proteins (genauer: des YFP), bei der sich die Fluoreszenz redox-abhängig ändert.V. V. Belousov, A. F. Fradkov, K. A. Lukyanov, D. B. Staroverov, K. S. Shakhbazov, A. V. Terskikh, S. Lukyanov: Genetically encoded fluorescent indicator for intracellular hydrogen peroxide. In: Nature Methods. Band 3, Nummer 4, April 2006, S. 281–286, . . PMID 16554833.
Eigenschaften HyPer ist ein Fusionsprotein aus cpYFP und dem Wasserstoffperoxid-sensitiven bakteriellen Protein OxyR.K. A. Lukyanov, V. V. Belousov: Genetically encoded fluorescent redox sensors. In: Biochimica et Biophysica Acta. Band 1840, Nummer 2, Februar 2014, S. 745–756, . (freier Volltext). PMID 23726987. Die Oxidation führt zu einer Spektralverschiebung der Absorption des HyPer von 420 nm zu 500 nm.
Anwendungen Das HyPer wird unter anderem als redox-abhängiger Biosensor und als Reporterprotein verwendet. Mit HyPer kann das Wasserstoffperoxid-abhängige Redox-Potential in vivo bestimmt werden.S. G. Rhee, T. S. Chang, W. Jeong, D. Kang: Methods for detection and measurement of hydrogen peroxide inside and outside of cells. In: Molecules and cells. Band 29, Nummer 6, Juni 2010, S. 539–549, . . PMID 20526816. Im endoplasmatischen Retikulum kann mit HyPer die Bildung von Wasserstoffperoxid verfolgt werden.I. Mehmeti, S. Lortz, S. Lenzen: The H2O2-sensitive HyPer protein targeted to the endoplasmic reticulum as a mirror of the oxidizing thiol-disulfide milieu. In: Free Radical Biology and Medicine. Band 53, Nummer 7, Oktober 2012, S. 1451–1458, . . PMID 22921589.M. Exposito-Rodriguez, P. P. Laissue, G. R. Littlejohn, N. Smirnoff, P. M. Mullineaux: The use of HyPer to examine spatial and temporal changes in H2O2 in high light-exposed plants. In: Methods in Enzymology. Band 527, 2013, S. 185–201, . . PMID 23830632. Alternative optische Nachweisverfahren verwenden z. B. Resazurin (synonym AlamarBlue), Dichlorofluorescein (DCF) oder die Proteine roGFP oder rxYFP.S. Pouvreau: Genetically encoded reactive oxygen species (ROS) and redox indicators. In: Biotechnology journal. Band 9, Nummer 2, Februar 2014, S. 282–293, . . PMID 24497389.
Einzelnachweise
Kategorie:Protein Kategorie:Fluorophor Kategorie:Indikator (Chemie) Kategorie:Biochemisches Nachweisverfahren Kategorie:Zellbiologie Kategorie:Abkürzung Kategorie:Biophysikalische Methode